导语:
目前,免疫组化已成为病理鉴别诊断工作中的常规工具,但脾脏疾病免疫组化的判读依然令人摸不着北,本文为大家介绍了正常脾脏以及脾脏良恶性疾病免疫表型的最新知识,由于篇幅所限,将分为五期进行发布,希望对各位同仁日常工作有所帮助。
脾脏的组织学
为了正确判读脾脏的免疫组化结果,我们首先需要了解正常脾脏的组织学和功能,这也有助于我们在判断脾脏病变时去寻找到底是哪个部位发生了改变。
脾脏基础免疫组化套餐: CD3, CD8, CD20,CD34, ERG, WT1 |
红髓淋巴样病变: CD8, CD68, CD34, DBA.44, annexin A1, BRAF V600E,CD25, CD103 |
白髓淋巴样病变: CD20, CD3, CD5, CD10, BCL6, BCL1 (cyclin D1), BCL2,Ki-67, MUM1, EBER, CD30, CD8 |
血管病变: ERG, CD31, CD34, factor VIII, D2-40, CD68, CD163, CD8,WT1 |
间质/组织细胞病变: CD21, CD23, CD35, LMP1, EBER, SMA, S100, ERG, CD31,CD34, WT1, CD68, CD163, CD1a ,CD3 |
T细胞或NK细胞淋巴瘤/白血病: CD2, CD3, CD5, CD7, EBER, TIA1, granzyme B, TCL1,CD56, CD4, CD8, CD30 |
囊肿: CD8, cytokeratin AE1/AE3, calretinin, GMS ERG |
表2. 脾脏中血管标记物比较
抗体 | 特异性 | 敏感性 | 特点 |
ERG | ↑↑↑ | ↑↑↑↑ | 核阳性,标记血管内皮和血管肿瘤 |
WT1 | ↑↑↑ | ↑↑↑ | 胞质阳性,背景着色比CD34轻 |
CD34 | ↑↑↑ | ↑↑ | 不能标记脾脏窦岸细胞、脾脏错构瘤或窦岸细胞血管瘤 |
CD31 | ↑↑ | ↑↑↑ | 非特异性,也能标记组织细胞和巨噬细胞 |
VIII 因子 | ↑↑ | ↑↑ | 二线抗体,较少使用,中等敏感性和特异性 |
↑↑表明特异性和/或敏感性较低;↑↑↑表示中度特异性和/或敏感性;↑↑↑↑表示特异性和/或敏感性最高。
图1 正常脾脏的免疫表型。
图1A,白髓,显示生发中心和套区/边缘区;
图1B,CD20显示白髓B细胞阳性;
图1C,CD3在白髓的散在T细胞中表达。
图1D,Bcl-2在正常白髓的生发中心显示阴性,但通常边缘区/套区阳性;
图1E,CD43在正常白髓的T细胞中表达;
图1F,CD21突出了白髓中的滤泡树突网状结构;
图1G至M,红髓;
图1G,红髓显示脾窦;
图1H,VIII因子染内皮细胞;
图1I,CD8突出了脾窦结构;
图1J,CD68在组织细胞中显示阳性;
图1K,ERG标记内皮细胞;
图1L,CD34也标记内皮细胞;
图1M,WT1是非常敏感的内皮标记;
图1N和O,显示T区。N,小动脉周围淋巴鞘,周围有淋巴细胞;
图1O,CD4显示辅助T细胞。
流式细胞术
当对正常脾脏组织进行流式细胞术分析时,可能会遇到一些异常的淋巴细胞亚群。大约20%到30%的非肿瘤性脾脏B淋巴细胞表达CD5,在人类免疫缺陷病毒(HIV)和自身免疫性疾病中,这些CD5阳性的非肿瘤性B淋巴细胞数目可以增加。不应将这些非肿瘤性的B细胞与套细胞淋巴瘤或慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤相混淆,后两者均表达CD5。少数CD4 +/ CD8+T细胞通常存在于正常脾脏中,其平均数量占T细胞的3.3%,最高达6%;通常CD4荧光着色明亮,而CD8荧光着色昏暗,不应将其误诊为T细胞淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤。一些T细胞抗原可能会在脾T细胞中丢失,因此不要认为是肿瘤性的。脾脏中一部分正常T淋巴细胞不表达CD7。脾脏中γδT细胞的比例(12.5%±8.1%)高于外周血(4.0%±3.1%);这些γδT细胞通常表达CD3,而不表达CD4,CD8和CD5。这些发现与αβT细胞群中的肿瘤形成有关,而与γδT细胞无关。有研究显示,大约有5%的脾脏T细胞为CD5 -;这些细胞大多数是CD8+或是γδT细胞。
脾脏中的自然杀伤(NK)细胞未成熟表型(CD56+ / CD16 -)数量比外周血多。此外,CD2-的NK细胞在脾脏组织中构成重要的正常细胞亚群,虽然CD7表达被认为是NK细胞的特征,但脾脏中CD7的表达却很普遍。
尽管流式细胞术是一种很好的免疫分型方法,例如应用于淋巴瘤等,但对于脾脏病变(如血管增生或间质病变)需重点进行组织学切片检查,以评估脾脏结构和免疫组化的表达情况。
未完待续......
迈新相关抗体
抗体名称 | 产品编号 | 克隆号 | 阳性部位 |
CD3* | MAB-0740 | MX036 | 胞膜 |
CD3 | Kit-0003 | SP7 | 胞膜 |
CD8 | RMA-0514 | SP16 | 胞膜 |
CD8 | MAB-0021 | C8/144B | 胞膜 |
CD20 | Kit-0001 | L26 | 胞膜 |
CD34 | Kit-0004 | QBEnd/10 | 胞膜/胞质 |
ERG* | RMA-0748 | MXR004 | 胞核 |
WT1* | MAB-0678 | MX012 | 胞核 |
*标为迈新克隆产品