1. 烤片温度与时间：低于蜡熔解温度烤可以过夜，或55~65℃，保证水分已被烤干为度（1-3小时）。温度过高会导致抗原丢失或减弱，实际操作中注意所用石蜡的熔点同时注意是否立即进行下一步骤操作。切片可直接冷冻保存，可在进入IHC操作前提前烘片。

2. 尽量晾干或甩干水分后烤片：如果捞片后马上烤片，因为蜡很快熔解，水分会因为表面张力的作用在组织下聚集呈水滴，引起组织细胞结构皱缩或散开，破坏组织细胞的正常结构，所以应晾干或甩干水分后烤片。

1. 增加修复液量，修复液液面高于玻片架3-5厘米，防止液体沸腾时反复冲刷组织引起脱片。

2. 将修复液加热到煮沸后，将热修复液加入有盖的染色缸中，再将玻片放入染色缸内，最后染色缸和玻片一同放入高压锅内继续操作。

3. 抗原修复后玻片自然冷却可以减少掉片。

1. 特殊组织特殊处理，如对于脂肪含量丰富的组织必要时进行脱脂处理。

2. 灭活内源性过氧化物酶操作中注意过氧化氢的浓度，浓度太大容易起气泡而导致脱片。

3. 甩片不要太用力，可用卫生纸从边缘吸干水分。

4. PBS缓冲液洗片时，尽量采用浸泡法。

5. 弱碱性环境进行返蓝，采用温水或PH7.2-7.4的PBS缓冲液。

参考文献：

[1] ,陈顺平, 朱育连, 郑云,等. HE染色常规石蜡病理组织切片烘烤温度与时间关系的探讨[J]. 诊断病理学杂志, 2013(02):61.

[2] 张睿, 马健波. 免疫组化染色防止脱片的几点体会[J]. 诊断病理学杂志, 23(5):2016